温州正规鼠尾胶原厂家供应

时间:2024年09月30日 来源:

鼠尾胶原,10mg包装,配制方法如下:1.配0.1M的乙酸溶液100ml。即取575ul冰乙酸加超纯水至100ml,容量瓶配制比较准确。2.用吸管吸取10ml刚配好的0.1M乙酸溶液(不要用*加,吸十次不如加一次z准确),加入盛胶原的瓶中,轻轻颠倒,不要震荡,蛋白容易起泡。几分钟即可,蛋白质非常好溶解。3.将胶原溶液移入事先压好的玻璃瓶中,比青霉素瓶大点的就行。用*在瓶底加1ml氯仿,打到一档就行,避免加入气泡。然后4度过夜除菌。4.第二天将上层胶原溶液分装进EP管中。用封口膜封口,4度保存,勿冷冻。本品可用于细胞培养皿的包被,特别适合普通细胞培养器皿不易贴壁细胞的培养。温州正规鼠尾胶原厂家供应

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含细胞三维胶原凝胶的制备(以配制1mg/mL三维胶1mL为例)准备好悬浮于培养液的细胞,并放置于冰浴中。将200μL本品加到12μL0.1mol/LNaOH中(如果反过来把12μL0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中,会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结),立即混匀。再加入23μL10×PBS或10×培养液,混匀后立即加到培养器皿中(混匀后pH为7左右,如果PBS或培养液中没有加酚红,初次使用时需要测定pH值)。加入760μL的细胞悬浮液,混匀后立即加到培养器皿中。将培养器皿在室温放置20min待胶凝固后,加入适当体积的细胞培养液,转移到培养箱中培养。本品在室温下pH中性时可迅速成胶,在操作过程中要尽量保持低温。保存条件4℃保存,切勿冻存,有效期一年。厦门鼠尾胶原平均价格鼠尾胶原醋酸溶解:建议将溶液转移到拧口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底铺上一层氯仿。

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鼠尾胶原蛋白的提取方法:1.一种生物医用鼠尾胶原蛋白的提取方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将无组织纤维、脂肪和多糖残留的鼠尾腱,真空冷冻干燥备用;(2)冻干鼠尾腱经低温冻干粉碎至200〜400目;(3)在冰水浴中将粉碎的鼠尾腱在醋酸溶液中溶胀,鼠尾腱与醋酸的固液比为I克:10mL〜I克:120mL,期间不断搅拌,防止冻结成块,得到胶原溶胀液;(4)称取胃蛋白酶加入到胶原溶胀液中,鼠尾腱与蛋白酶质量比为50:I〜100:1,在4°C,48〜74小时酶解,期间间歇性搅拌。

详细步骤如下:1.75%酒精浸泡大鼠尾巴30min;2.将尾巴剪开、去掉皮毛,并剪成小段(3cm左右),抽出银色的尾键;3.把剪碎的尾键置于150ml,0.1%消过毒的醋酸中,4℃放置,并不时振荡;4.48h后取上清,4000转离心30min后,取上清;5.分装上清(鼠尾胶)4度(或-20度)保存。有时可继续向4。中沉淀中加入10-20ml醋酸,重复以上步骤,以制备更多的鼠尾胶。在使用时,先将冰存的胶原液在室温下解冻,再按以下步骤包被培养器皿:1)用吸管吸取胶原液,在无菌的培养器皿的生长面内壁上均匀地涂上薄薄的一层胶原溶液。2)若包被的是培养瓶,可向培养瓶通入氨气或用浸有氨水的棉球封口片刻。让氨气充入瓶内后,即可旋紧瓶盖或塞紧瓶塞。若为培养皿或板的话,可将培养皿或板放在已消毒的饭盒内,将浸有氨水的棉球放入饭盒内,盖紧饭盒盖,四周用封口胶封死。鼠尾胶原醋酸溶解:氯仿的量约为胶原溶液的10%。

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鼠尾胶原是一种天然培养基,它具有促进体外培养细胞(特别是上皮细胞)贴壁的作用,同时它也是一种天然的黏附剂,当我们需要在培养瓶或培养皿内放置小玻片,制备细胞爬片时,可在瓶底涂一层胶原,再放上小玻片,自然干燥后小玻片就固定于培养瓶之中。通过本实验可掌握鼠尾胶原的制备方法,以及如何切割小玻片,并利用鼠尾胶原将其固定于培养瓶内。实验设备及材料:大鼠尾巴、剪刀、镊子、止血钳、弯头吸管、平皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、天平、生理盐水、75%酒精、0.1%醋酸溶液、盖玻片、培养瓶、钻石笔、鼠尾胶原。实验内容:1、制备鼠尾胶原。2、切割小玻片。3、利用鼠尾胶原将小玻片固定于培养瓶内。加到相应的培养器皿中,确保胶原蛋白溶液铺满器皿的表面。厦门正规鼠尾胶原哪里买

胶原蛋白降低了蛋白的免疫原性,提高了产率和生物相容性,降低了成本,适用于生物医用材料。温州正规鼠尾胶原厂家供应

鼠尾胶原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事项:通过醋酸抽提、氯化钠沉淀、磷酸氢二钠沉淀等步骤制备的。鼠尾胶原蛋白可用于包被细胞培养器皿,培养一些在普通细胞培养器皿中不易贴壁的细胞。也可用于制备三维胶,模拟真实的生长环境,使细胞在三维环境中生长。1,在使用鼠胶原蛋白型包被的细胞培养皿中检查到PC-12细胞的贴壁和生长。1mg/ml浓度以上,pH左右时可形成具有一定强度的三维胶,检查到NIH-3T3细胞在三维胶内正常生长、PC-12细胞在三维胶表面正常生长。使用方法:1、细胞培养器皿的表面包被推荐浓度:1-5ug/cm0.012mg/ml。按以下表格体积加到相应的培养器皿中。温州正规鼠尾胶原厂家供应

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